Kollagen hujayradan tashqari interstitsial komponent bo'lib, u organizmda erimaydigan makromolekulyar tuzilma sifatida mavjud bo'lib, oqsil polisakkaridlari, glikoproteinlar va boshqalar bilan birlashtiriladi. Shuning uchun kollagenni ekstraksiya qilish texnologiyasi murakkab va ko'p bosqichlardan iborat bo'lib, odatda to'qima materiallarini tanlash; oldindan davolash, Kollagenni ekstraktsiya qilish, ajratish va kollagenning har xil turlarini tozalash, ular orasida kollagenni olish eng muhim hisoblanadi.
To'qima materialini tanlash va dastlabki ishlov berish
Kollagen ekstraktsiyasi uchun ishlatiladigan to'qima materialini ehtiyotkorlik bilan davolash kerak, eng muhimi, qiyma go'sht, yog 'va boshqalar kabi kollagen bo'lmagan qo'shimchalarni qirib tashlash va yog'ni o'z ichiga olgan yog'lar paydo bo'lishiga yo'l qo'ymaslik uchun uni organik erituvchi bilan ajratib olishdir. kollagen suti. loyqa suyuqlik. Suyak to'qimasida kaltsiy va xaftaga tushadigan proteoglikanni keyinchalik olib tashlangandan so'ng, to'qima materialini kollagen ekstraktsiyasi uchun dilimlash, maydalash yoki homogenlash mumkin.
Hayvonlardan olingan kollagenning ekstraktsiyasi
An'anaga ko'ra, kollagen asosan cho'chqa va qoramol kabi quruqlikdagi hayvonlarning terisi va suyaklaridan olinadi. Yaqinda baliq terisi, suyaklari va tarozilari ham kollagenga boy ekanligi aniqlandi. Suvdagi hayvonlarning to'qimalaridan kollagenni ajratib olish nafaqat suv resurslaridan to'liq foydalanish va suv mahsulotlarini qayta ishlashning qo'shimcha qiymatini oshirish, balki ifloslanishni kamaytirish va ekologik jihatdan qulayroq bo'lishi mumkin. Shu bilan birga, jinni sigir kasalligi va oyoq va og'iz kasalligi kabi chorvachilik kasalliklari mavjudligi sababli, odamlar suv kollagenining chorvachilikdan olingan kollagenga qaraganda yuqori xavfsizligiga ishonishga tayyor. Shuning uchun baliq terisi, tarozi va suyaklari kabi akvakultura chiqindilaridan kollagen olish tobora ko'proq e'tiborni tortmoqda.
Umumiy kollagen ekstraktsiya protokollari:
Kislota chiqarish usuli - bu ekstraktsiya usuli bo'lib, unda xom ashyo kislotali namlash orqali oldindan ishlov beriladi va keyin santrifüj kabi bir qator operatsiyalar bilan tozalanadi. Umumiy kislotalarga xlorid kislotasi, oksalat kislotasi, sirka kislotasi, sirka kislotasi, limon kislotasi va sut kislotasi kiradi. Bog'langan yog 'spiral bo'lmagan terminal peptidni olib tashlash va kollagen tolalarini eritish uchun gidroksidi eritma bilan sovunlanish reaktsiyasidan o'tadi. Natriy gidroksidi, natriy karbonat va kaltsiy gidroksidi ko'pincha gidroksidi tozalash vositalaridan foydalaniladi. Ishqoriy sharoitda kollagenning peptid bog'lari oson gidrolizlanadi va uning o'ta o'ralgan tuzilishi buziladi. Shuning uchun kollagenni gidroksidi usul bilan olish bo'yicha bir nechta tadqiqotlar mavjud. U kislotali eritmalarda yoki neytral tuz eritmalarida eriydi. Enzimatik ravishda ekstraksiya qilingan kollagenning biomedikal materiallarda keng qo'llanilishining sabablaridan biri uning past immunitet ko'rsatkichidir va tez-tez ishlatiladigan fermentlar orasida tripsin, pepsin, papain va neytral proteaz mavjud.
Uyda kollagenni qanday tayyorlash mumkin?
Kollagen xom teridagi eng muhim fibrin bo'lib, hayvonlar terisining asosiy tarkibiy qismidir.
1. Sigir terisini xom ashyo sifatida ishlatish, sigir terisini oldindan tozalash, miqdoriy ravishda kaustik soda qo'shish, pH ni sozlash, gidroksidi proteaza qo'shish, yuvish, filtratni yig'ish, tuzlash, yog'ingarchilikni santrifüjlash va muzlatish bilan quritish, yassi sigirining qattiq kollagenini nihoyat chiqariladi. Proteinli mahsulotlar uchun ortogonal test bilan aniqlangan yassi terisi kollagenini tayyorlashning maqbul shartlari 1:35 (g: ml) qattiq suyuqlik nisbati, 1,5 foiz proteaz dozasi (massa ulushi) va 12 soat yuvish vaqtidir. , ning yuvish vaqti Harorat 36 darajaga ko'tarildi.
2. Cho'chqa terisi kollagenini olish jarayoni quyidagicha: 1:10 (g: ml) nisbati bo'yicha 0.1 mol/L NaOH eritmasi qo'shing, 6 soat davomida namlang va yog'sizlantiring, 24 soat davomida fermentativ gidroliz. h, tuzlash uchun to'liq erigan natriy xlorid eritmasini tomchilab qo'shing, so'ngra dializ va kollagenni sirka kislotasi eritmasi va deionlangan suv bilan tozalang va kollagen namunalarini olish uchun liyofilizatsiya qiling.
3. Baliq terisidan kollagenni kislotali usul va fermentlarni ekstraksiyalash usuli bilan ajratib olish operatsiya bosqichlari rasmda keltirilgan: